Stanovení exprese proteinu EGFR1 pomocí EGFR1pharmDx (DakoCytomation)
Test EGFR pharmDx™ je souprava pro imunohistochemické (IHC) testy pro identifikaci exprese receptoru epidermálního růstového faktoru (EGFR) v normálních a neoplastických tkáních fixovaných běžným způsobem pro histologické vyšetření. EGFR pharmDx specificky detekuje protein EGFR (HER1) v buňkách exprimujících EGFR.
Receptor epidermálního růstového faktoru je transmembránový receptor 170 kD kódovaný lidským genem HER1. Protein EGFR obsahuje extracelulární doménu vázající ligand, transmembránovou oblast a intracelulární doménu s vlastní protein tyrozinkinázovou aktivitou. EGFR je homologní s jinými členy rodiny receptorů EGF/erbB včetně HER2/erbB2 nebo neu, HER3/erbB3 a HER4/erbB4. Protein EGFR je exprimován různými normálními buňkami včetně mnoha typů epiteliálních buněk a z nich odvozených nádorů. Mezi neepiteliální typy buněk, které exprimují EGFR, patří buňky hladkého svalstva, fibroblastů a nervů.
Souprava EGFR pharmDx IHC obsahuje činidla požadovaná pro úplnou metodu IHC barvení pro vzorky fixované běžným způsobem a zalité v parafínu. Po inkubaci primární monoklonální protilátky, proti lidskému proteinu EGFR, využívá tato souprava předem připravené vizualizační činidlo založené na dextranové technologii. Toto činidlo se skládá z molekul sekundární kozí anti-myší protilátky a molekul křenové peroxidázy navázaných na společný hlavní řetězec dextranového polymeru, a tak eliminuje nutnost sekvenční aplikace vazby protilátky a konjugátu peroxidázy. Enzymatická přeměna následně přidaného chromogenu vede k vytvoření viditelného reakčního produktu v místě protilátky. Vzorek je po kontrastním podbarvení odečítán pomocí světelného mikroskopu.
Výsledek imunohistochemická detekce exprese proteinu EGFR1